尊龙凯时对人横纹肌肉瘤细胞A-673(STR)的培养条件进行详细说明，以便研究者在癌症研究、肿瘤生物学及药物筛选等领域能更高效地应用这款细胞系。以下是关于该细胞系的培养和传代流程的介绍。

培养条件

尊龙凯时推荐的培养条件为：气相组成须为95%空气与5%二氧化碳，培养温度设定为37℃。A-673细胞系源自一位15岁的女性患者，采用STR分析以确保证其身份与遗传特性的一致性，适合用作横纹肌肉瘤的体外实验。

细胞传代方法

首次传代时建议以1:2的比例进行。细胞每2天更换培养基。为确保细胞运输的最佳效果，建议在收到细胞后待其状态良好再将完全培养液灌满瓶口并密封。收到细胞时，请勿立即开瓶，需确认培养瓶上的细胞名称与订购一致，并检查瓶体是否有损坏或渗漏情况。如果无异常，使用显微镜观察细胞生长，拍摄不同倍数的照片保存。

贴壁细胞传代步骤

1. 弃去上清液，用不含钙、镁的PBS清洗细胞1-2次。
2. 添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞状态，若细胞大部分变圆后迅速取出，加入超过5ml的完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞，使其完全脱落，并转移至15ml离心管中，在1000RPM下离心5分钟，弃去上清液后重悬于1-2ml完全培养基中。
4. 将细胞悬液按1:2的比例分至新T25瓶中，补充新的完全培养基至5-8ml，然后放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。

悬浮细胞传代步骤

1. 半充换液法：将培养瓶竖立静置1小时，轻吸掉约3ml的培养基，再补充3ml的完全培养基。如果培养基颜色异常，可以直接添加500μl的FBS，或分两个培养瓶进行传代，通常3次后需离心去除死细胞。
2. 离心换液法：如需分瓶，将细胞悬液收集至离心管中，1000RPM离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml培养液重悬，按1:2的比例分至新T25瓶中，添加6-8ml新配制的完全培养基以维持细胞活力。

细胞冻存和复苏方法

1. 当细胞生长至培养瓶的80%时，弃去培养液，用PBS清洗。
2. 添加约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液，待细胞卷曲并变圆后，加入5ml完全培养基终止消化，轻击瓶壁使细胞脱落并转移至离心管中，1000rpm离心5分钟。
3. 弃去上清，加入1ml无血清冻存液，充分混匀后装入冻存管中，存于-80℃冰箱超过24小时后可转入液氮罐。
4. 复苏时需迅速置于37℃水浴中解冻，转移至含5ml完全培养基的离心管中，再进行离心和重悬，最后接种至培养瓶中继续培养。

注意事项

在运输过程中，细胞可能因粘附不牢而脱落，倘若发生此类情况，建议将培养液收集并进行离心处理。关于细胞的状态，强烈建议通过拍照记录，以便后续处理。如果在七天内出现任何问题，请及时与尊龙凯时联系，我们会依据相关的检验标准予以处理。

重发政策

在特定情况下，细胞的问题可获得重发，例如运输期间细胞丢失、污染等，而由于客户原因导致的问题则不予重发。请详细关注我们的重发政策，以确保您获得优质服务和支持。